Trypsin蛋白酶使用说明书
货号:OSFP-Tryp 规格: 1mg
产品信息:
产品说明:胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,其活性位点包含一个丝氨酸残基,主要作用于蛋白质肽链中赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)残基的羧基端肽键。这种特异性使得胰蛋白酶能够高效地分解蛋白质,将其分解为较小的肽段和氨基酸。但在实验过程中胰蛋白酶会攻击自身特定的赖氨酸或精氨酸残基,导致其自身结构的破坏和活性的丧失,影响实验的效果。胰蛋白酶自酶切可能导致完全酶切肽段的数量减少、增加未完全酶切肽段的数量以及还可能增加半酶切肽段的数量,这些都会增加质谱分析的复杂性,导致数据处理难度增加、定量分析的准确性降低。Omicsolution胰蛋白酶来源于大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达,通过使用稳定剂增强胰蛋白酶的酶切特异性。
状态:白色结晶性粉末;
复溶Buffer:50mM 醋酸或者自带的复溶buffer;
储存条件:-20℃或-80℃条件下保存12个月;
使用建议:按照20:1-100:1的蛋白和蛋白酶的量(W/W)进行酶解,37℃反应14-16h。
注意事项:
pH值:胰蛋白酶在pH 7 - 9的碱性环境中活性最高,但在pH值低于4时会失活。因此,当酶解体系的pH值偏离其最适范围时,可能会导致胰蛋白酶的自酶切;
温度:胰蛋白酶的最适温度为37℃左右。如果酶解温度过高,可能会加速胰蛋白酶的自酶切,导致酶活性下降;
酶与底物比例:酶与底物的比例通常为1:20 - 1:100(w/w)。如果酶浓度过高,可能会增加胰蛋白酶分子间的相互作用,从而促进自酶切;
反应时间:合理控制酶解时间,避免过度酶解;
反应体系:酶解反应体系中建议尿素的含量低于2M,不能含有SDS。
质量控制检验
检验依据:重组胰蛋白酶质量标准:SOP-04-304-00
| 检验项目 | 标准规定 | 检验结果 | 结论 |
| 外 观 | 白色或类白色结晶性粉末 | 白色结晶性粉末 | 通过 |
| 效 价 |
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4581 Units/mg | 通过 |
比 活 蛋白质 |
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通过 |
| 纯 度 | β-胰蛋白酶不低于70% α-胰蛋白酶不高于20% |
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通过 |
| 细菌内毒素 |
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通过 |
| 微生物限度 |
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通过 |
| 结 论 | 符合质量标准文件的标准 | ||
检验员: 复核人:
日期:
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