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title: "易算生物Ultra High Performance nanoflow色谱柱使用须知"
author: "omicsolution"
account: "omicsolution"
published_at: "2021-06-15T17:40:54+08:00"
captured_at: "2026-08-24T11:50:16.240029+08:00"
source_url: "https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzI2MTI5NDAzNg==&mid=100002253&idx=1&sn=a0bbaee5dcf8f776fc2a3d1b417a3ef2&chksm=6a5ddb765d2a5260851155925f3199e4a3c1f4b782fa155e0ea6001e183698bf86fec366c989#rd"
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# 易算生物Ultra High Performance nanoflow色谱柱使用须知
液相与离子源连接管路

建议使用以下规格石英毛细管外经360um，内径20um,50cm长。

色谱柱规格

1.带护套、带Viper接口规格IonOpticks色谱柱（Nanoviper，Bruker接口，25cm长，75μm内径、1.6μm填料）

![图片 1](images/001.png)

2.带护套、无Viper接口的Omicsolution色谱柱（包含多种规格）

![图片 2](images/002.png)

安装

![图片 3](images/003.png)

1.Ionopticks色谱柱连接

![图片 4](images/004.png)

2.Omicsolution色谱柱连接：三通（根据石英毛细管柱压力购买耐受不同压力的三通，也可直接购买耐压最高的金属三通）三通一端连接液相管路，一端连接毛细管色谱柱，一端连接质谱电压，如下图（注：请注意毛细管路连接三通口是否切割平整，每次管路连接都需要查看，不平整的管路连接后会使三通残留石英玻璃碎渣，从而导致液相压力增加，严重会损坏三通及色谱柱。）：

![图片 5](images/005.png)

![图片 6](images/006.png)

如果是四通，可加一个死堵：

![图片 7](images/007.png)

使用及保养

推荐Buffer组份：

流动A：99.9%MilliQ水，0.1%甲酸

流动B：99.9%乙腈，0.1%甲酸

柱体积：25cm X 75μm 1.1μl

毛细管色谱柱初次使用：安装好毛细管色谱柱后应先开启柱温到40-60度，70%流动相B有机相，以400nl/min冲洗1 0-20min，或者直到压力在几分钟内保持稳定。当流动相到达喷针时，施加电压。在使用标准品评估分析柱性能之前，建议在没有样本注入的情况下至少跑2-3针30min Blank梯度。

柱平衡：在每次跑样前，应该使用至少4倍柱体积的100%流动相A进行柱平衡。柱平衡压力应在1000bar以下。

毛细管色谱柱保存：如非必要，请不要从UHPLC系统中拆卸分析柱。拆除步骤：以正常样本运行流速、80%B运行5min，流速降为0.002µl/min持续10min或直到背压稳定在10bar以下。将MS系统设置为待机模式。现在可以移除，套管推回原位。为了长时间保存，对于IonOpticks色谱柱，我们建议加甲醇30µl于nanoZero®中，拧好堵头后进行保存。对于Omicsolution色谱柱，取下后，喷针使用80%甲醇（弯嘴壶）冲洗，然后套管推回原位保存。注：毛细管色谱柱一旦从液相取下，填料里面的有机试剂很快会被挥发，喷针因液体挥发，盐析出，从而导致毛细管喷针口被盐堵住。

毛细管色谱柱再次使用：移动喷针保护套管，使用80%甲醇（弯嘴壶）冲洗喷针后安装毛细管色谱柱，应使用方法的起始梯度平衡柱子20min以上再跑正式样品。注：毛细管色谱柱一旦从液相取下，填料里面的有机试剂很快会被挥发，喷针因液体挥发，盐析出，从而导致毛细管喷针口被盐堵住，同时毛细管里面填料状态为干粉状，再次使用需要改变填料状态为起始梯度的湿润状态。拆卸后再次使用会导致喷针污损和柱效变差。如果分析柱从UHPLC系统中拆卸过，那么我司不对柱效负责。

正常流速及柱压：一般~25cm石英毛细管柱（75μm内径，1.6~1.9μm填料）流速设置在2 50-300 nl/min，压力约4 5 0 bar，一般不会超过5 00 bar。柱温设置一般为55℃。

毛细管色谱柱喷针在离子源区的清洗：每周建议2、3次对喷针使用80%甲醇冲洗后使用纯甲醇冲洗，然后开启质谱扫描，查看是否存在液体挂喷针现象。注：毛细管一体柱喷针在使用一段时间后容易出现喷针头部出现液体挂在上面现象，理论上来说，在跑样品过程中，质谱仪器给了通过毛细管色谱柱的流动相电压，在喷针头部应该是不可见的喷雾状（此喷雾可在激光灯下可见）。如果见到此现象，可能有以下原因：1离子源区喷雾电压需要调整2喷针头部有脏东西影响喷雾3喷针头部损坏。一般喷针只要小心使用并在拆卸过程中保护的很好的话，使用寿命会增加很多（在离子源区高倍摄影机器上可观察毛细管喷针状态）