4000+ 次进样，稳定如一：Aurora Rapid 8×75 XT 色谱柱应用速递
01｜真实高负载场景：4000+ 样本单细胞蛋白质组学数据集
本研究采用 Aurora Rapid 8 cm × 75 µm XT column 与 trap column，配合 Thermo Scientific Vanquish Neo UHPLC 和 Thermo Scientific Orbitrap Astral MS，对 4000+ 样本单细胞蛋白质组学数据集进行分析。
为持续监控系统状态，本实验在每约 60 次单细胞样本运行后插入一次 HeLa tryptic peptide digest QC（50 pg），并使用 144 SPD 方法进行质量控制；整个队列共完成 63 次 QC 运行。
实验设计与系统配置：Aurora® Rapid™ 8×75 XT column、HeatSync™ Column Heater、Vanquish Neo LC 与 Orbitrap Astral MS。
02｜高通量下的稳定检测：蛋白质组与肽段数量可靠稳定
在 144 SPD 方法下，HeLa 50 pg QC 运行于整个 4000+ 样本队列中保持稳定识别能力：每次运行持续鉴定超过 3,000 个 unique protein groups 和超过 15,000 条 unique peptides。
这意味着在高通量梯度和长周期使用条件下，色谱系统仍能维持较高灵敏度与识别能力，为大规模蛋白质组学数据采集提供稳定基础。
高通量识别能力：routine HeLa QC runs 在 4000+ 样本队列中持续获得稳定识别结果。
03｜背压稳定：长周期运行中的柱稳定性关键指标
背压是评估纳流 LC 系统稳定性和色谱柱状态的重要指标。本实验通过提取 QC 运行中的 5 分钟背压值进行监测，结果显示在 4000 次进样过程中背压保持稳定。
稳定背压反映出 Aurora Rapid8×75 XT column 在长时间使用中的稳定性与耐用性，有助于降低长周期实验中的方法漂移风险。
背压稳定性：4000 次进样期间，QC 样本背压值保持一致。
04｜保留时间稳定：增强大队列结果的可比性
对于大队列蛋白质组学，保留时间漂移越小，越有利于跨批次峰识别、定量比对和下游统计分析。本次实验监测了在所有 QC 运行中都可检出的 10 条代表性肽段。
结果显示，这些肽段在 4000 次连续进样中的保留时间保持高度一致，漂移较小，体现了色谱重复性对高可信结果的重要支撑。
保留时间稳定性：10 条代表性肽段在 4000 次进样中的保留时间表现稳定。
05｜QC 重复性与窄峰宽：让定量更有信心
63 次 HeLa QC 的蛋白强度定量相关性矩阵显示，平均 Pearson 相关系数超过 0.99，表明 QC 注射之间具有高度一致的定量表现。
同时，FWHM 中位数保持稳定且峰宽较窄，说明峰形尖锐、重复性良好。这对于需要长期运行和可靠定量的大规模工作流尤为关键。
QC 重复性与峰宽表现：平均 Pearson 相关性 >0.99，FWHM 保持稳定。
06｜方法概览：稳定性来自系统级优化
本文中的色谱分离在 Thermo Scientific Vanquish Neo UHPLC 系统上完成，Aurora Rapi 8 cm × 75 µm XT column 设定为 50 °C，并采用反向冲洗 trap-and-elute 配置。
质谱采集使用 Thermo Scientific Orbitrap Astral MS；原始数据由 Spectronaut 20.2 分析。该组合为高通量、长周期单细胞蛋白质组学实验提供了系统级稳定性验证。
方法与产品场景：Aurora® Rapid™ 8×75 XT 与 HeatSync™ 柱温系统。
结语｜面向大规模、高通量与纵向研究的可靠选择
在 4000+ 次进样的长周期运行中，Aurora Rapid8×75 XT column 可持续保持稳定背压、保留时间和检测灵敏度，并在 QC 注射中呈现高度可重复的蛋白质定量结果。
这一表现对于需要长期运行、批次一致性和可靠定量的单细胞蛋白质组学、大队列研究及纵向项目具有重要意义。