蛋白质组学研究的困难很多,但是办法总比困难多,前提是你的工具要与时俱进。以万事开头第一步来说,如果我接到一个新课题,一个我不熟悉的物种,那如何来指导质谱搜库呢?
如果您已经比较熟悉蛋白质组的分析流程了,自然立刻就想到了UniProt。
但UniProt还是没法做到大而全,总有些物种被它遗漏,那该如何是好呢?在当下AI满地跑的时候,我们自然想到了求助于AI,但AI其实也只能是帮你进行快速网络检索和挑选,所以对于这类数据或数据库寻找的工具还是类似于ChatGPT会更好使点(国内AI在检索国外数据库时还是有比较大劣势的)。不过众所周知的蛋白资源库是UniProt,而基因资源库则是NCBI以及Ensembl,ChatGPT据我观察默认似乎并不检索Ensembl,只能说各有各的优缺点吧。
今天我以最近遇到过的需求为例(还算挺典型的),后续还找不到资源的话要么的确没有,要么你学的不到位,亦可私聊我司。
大致分析阶段先总结如下:
确认准确物种科学命名
UniProt Proteome搜索:
c. NCBI,Ensembl基因组库寻找或求助AI
d. 基于AI的指导谨慎判断或寻找更准确资源,参见如下实践攻略:
今天举例5个物种,作为典型范例:
1.柠檬
2.火龙果
3.蚯蚓
4.芭乐
5.沙棘
万事第一步先明确想要做的物种的拉丁文名称,你可以百度百科,也可以Kimi,豆包之类的问:

当然不能完全信任AI,把结果输入UniProt Taxonomy https://www.uniprot.org/taxonomy查询确认:

比如柠檬就没啥问题,直接用Citrums Limon。

而火龙果就用了已经被退役的名称,需要更改为Selenicereus Undatus

而蚯蚓则经过确认后采用Lumbricus Terrestris。
当然,以上物种UniProt均暂未收入蛋白质组序列。(不要因为有的物种搜到个1000、2000个蛋白就用了,这个非常不全面,不建议)
正常情况下我们采用以下策略进行进一步检索:
1.Ensembl或NCBI基因组库查询是否有拼接蛋白序列(虽然还没被认可为Uniprot Proteome,但也能凑合过)
2.寻找相关专业数据库看是否有收入(您要是相关物种专业的,可能也不会来找我了)或者相对泛的,如https://portal.darwintreeoflife.org/ 搜索相应物种,找到protein 序列。
3.查询相关文献
以上方法都不简单,或者容易忘记。所以邪修大法就是用chatGPT。
首先看
(1)柠檬:

你就会得到参考结果:

点击推荐的链接

然后AI就不能信了,你得自力更生,点击左上角 Primary Assembly Details,再点击左上角新出来的Downloads,选择All proteins[FASTA format]即可。

Alternative assembly的也可以顺便下载下对比结果。
(2)火龙果
得稍微曲线救国下

找到文献,发现没提供文件。兜兜转转发现Kimi反而找到了,因为资源是国内的信息


(3)蚯蚓

找到这篇文献后连接到ensembl,发现就是来自Darwin Tree。兜兜转转后才找到最终资源:


(4)芭乐

我们首先去推荐的GCA_016432845.1项目下查看,发现并没有Protein 序列可以获取

但还好,NCBI Genome下搜索芭乐,发现GCA_023344035.1是有好人的,提供了拼接完成的蛋白序列,解决了我们的困扰。


所以AI虽然可以提供比较好的指导建议,但的确无法帮我们去验证是否一定能获取到信息。
(5)沙棘
而沙棘这种国内研究较多的物种则可以在国内AI里快速找到资源,CNBGdb上找到相应物种信息。


点击下载数据后可以找到pep下载。
