Trypsin蛋白酶使用说明书
货号:OSFP-Tryp-HP 规格:20μg 版本号:V20260609
产品信息:
产品说明:胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,其活性位点包含一个丝氨酸残基,主要作用于蛋白质肽链中赖氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)残基的羧基端肽键。这种特异性使得胰蛋白酶能够高效地分解蛋白质,将其分解为较小的肽段和氨基酸。但在实验过程中胰蛋白酶会攻击自身特定的赖氨酸或精氨酸残基,导致其自身结构的破坏和活性的丧失,影响实验的效果。胰蛋白酶自酶切可能导致完全酶切肽段的数量减少、增加未完全酶切肽段的数量以及还可能增加半酶切肽段的数量,这些都会增加质谱分析的复杂性,导致数据处理难度增加、定量分析的准确性降低。Omicsolution高性能胰蛋白酶来源于大肠杆菌(Escherichia coli)重组表达,通过使用稳定剂以及化学修饰减少自酶切的发生,增强胰蛋白酶的酶切特异性。
批次号:OSTH20260108;
状态:透明澄清液体;
Buffer成分:10mM HCl,10mM CaCl2;
浓度:2ug/ul;
储存条件:-20℃或-80℃条件下保存12个月;
使用建议:按照20:1-100:1的蛋白和蛋白酶的量(W/W)进行酶解,37℃反应2-16h,具体反应时间可以根据加入酶量的多少进行相对应的调整。
注意事项:
pH值:胰蛋白酶在pH 7 - 9的碱性环境中活性最高,但在pH值低于4时会失活。因此,当酶解体系的pH值偏离其最适范围时,可能会导致胰蛋白酶的自酶切;
温度:胰蛋白酶的最适温度为37℃左右。如果酶解温度过高,可能会加速胰蛋白酶的自酶切,导致酶活性下降;
酶与底物比例:酶与底物的比例通常为1:20 - 1:100(w/w)。如果酶浓度过高,可能会增加胰蛋白酶分子间的相互作用,从而促进自酶切;
反应时间:合理控制酶解时间,避免过度酶解;
反应体系:酶解反应体系中建议尿素的含量低于2M,不能含有SDS。
质量控制
纯度:>95%;
分子量:主峰为 23743Da,见下图:
酶浓度:2 mg/ml;比活性:4337 U/mg;
活力单位:在 25℃ , pH7.6 的磷酸缓冲液中,每分钟水解底物 BAEE,使 253nm 处的吸光度 增加 0.003 的酶量定义为 1 个单位。
检验员: 复核人:
日期:
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