PNGaseF糖苷酶使用说明书
货号:OSFP-PNG 规格: 100,000units
产品信息:
产品说明:PNGase F糖苷酶是一种酰胺水解酶,特异性的切割糖蛋白上的N-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖,切割位点为最内侧的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间。Omicsolution 的 PNGase F糖苷酶从大肠杆菌(Escherichia coli)中提取纯化,可以从糖肽/糖蛋白中水解几乎所有类型的 N-糖链。当 α1–6岩藻糖位于 GlcNAc 核心时,PNGase F 可以切割,但当 α1-3 岩藻糖位于 GlcNAc 核心时,则PNGase F不能切割,这种修饰常见于植物和部分昆虫糖蛋白。
状态:透明澄清液体;
Buffer成分:10mM Tris-HCl pH7.4,100mM NaCl,5mM EDTA,50%甘油;
储存条件:-20℃或-4℃条件下保存12个月;
使用方法:1-20μg变性糖蛋白,加入50mM碳酸氢铵至终体积为2μl,然后加入1μl PNGase F混匀,37℃反应1-3h;非变性条件下酶切需要更长的时间,如12-24h。(在变性条件下,需要使用含有SDS和DTT的变性缓冲液,但SDS会抑制PNGase F的活性,因此必须在反应混合物中加入NP-40)
注意事项:
pH值:PNGase F在pH 7.5左右的环境中活性最高;
温度:PNGase F酶切的最适温度为37℃左右。
反应时间:合理控制酶解时间,避免过度酶解。
质量控制
分子量:约37 kDa
标签:N端His标签
纯度:>95%
比活性:500,000 units/ml
酶活定义:1个酶活力单位指在10 μl反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
PNGase F(U),37℃ 1h
Rnase B
PNGase F
KDa M 0 0.25 0.5 1 2 4
PNGase F
glycosylated Rnase B
deglycosylated Rnase B
检验员: 复核人:
日期:
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